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pEE 6.4载体基本信息
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载体名称:
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pEE6.4, pEE 6.4
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质粒类型:
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GS系统哺乳动物细胞蛋白表达载体，抗体表达载体
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高拷贝/低拷贝:
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高拷贝
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启动子:
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hCMV-MIE
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克隆方法:
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多克隆位点，限制性内切酶
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载体大小:
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5067bp
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5' 测序引物及序列:
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--
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3' 测序引物及序列:
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SV40pA-R
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载体标签:
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--
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载体抗性:
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氨苄
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筛选标记:
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GS (Glutamine Synthetase, 谷氨酰胺合成酶)
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备注:
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配套细胞是NSO细胞或者CHOK1SV细胞
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稳定性:
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稳定表达
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组成型:
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--
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病毒/非病毒:
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非病毒
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pEE 6.4载体简介
Lonza生物公司的Glutamine Synthetase(GS, 谷氨酰胺合成酶)基因表达系统载体pEE6.4载体，利用谷氨酰胺合成酶筛选标记，能够高水平的在哺乳细胞内表达目的基因。
GS酶是生物体内以谷氨酸和氨为底物合成谷氨酰胺的酶。GS酶的活性能够被甲硫氨酸砜亚胺（methionine sulphoximine，MSX）选择性的抑制。一些哺乳动物细胞，例如小鼠骨髓瘤细胞(NSO细胞系)无法表达GS，所以在不添加谷氨酰胺的情况下， 细胞将无法生长。对于这些细胞系，在无谷氨酰胺的培养基内，一个转染的GS基因可以作为一个筛选标记。其他的一些细胞系，例如CHO-KI，能够产生内源 性的GS酶。对于这些细胞，在无谷氨酰胺培养基内，在高水平足够抑制GS酶合成的MSX（甲硫氨酸砜亚胺）的作用下，可以对细胞的生长提供一个选择压力。
1992年，Bebbington等首次报道了使用GS基因细胞系统表达重组的抗体。该载体能够被用来构建快速，高产量，稳定的单克隆抗体表达细胞系。
全序列
