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pET系列质粒

pETDuet-1 大肠杆菌蛋白双表达载体,有两个多克隆位点
发布时间:2018-05-28 11:31:03 | 浏览次数:


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pETDuet1载体基本信息


pETDuet1载体简介

pETDuet-1载体被设计用来在大肠杆菌中同时表达两个外源基因. 载体含有两个多克隆位点,每一个多克隆位点是通过T7启动子/Lac操纵子和一个核糖体结合位点组成。pETDuet-1携带有pBR322质粒来源的ColE1复制子, lacI基因和氨苄抗性基因。

本载体可以与pACYCDuet-1载体联合使用,在合适的宿主菌中,可以一起共表达至多4个目的基因。插入在pETDuet-1载体多克隆位点1的目的基因可以使用pET Upstream Primer (Cat. No. 69214-3)和DuetDOWN1 Primer (Cat. No. 71179-3)进行测序,插入在多克隆位点2的目的基因可以通过DuetUP2 Primer (Cat. No. 71180-3)和T7 Terminator Primer (Cat. No. 69337-3)进行目的基因测序。


全序列

1        GGGGAATTGT GAGCGGATAA CAATTCCCCT CTAGAAATAA TTTTGTTTAA CTTTAAGAAG
61       GAGATATACC ATGGGCAGCA GCCATCACCA TCATCACCAC AGCCAGGATC CGAATTCGAG
121      CTCGGCGCGC CTGCAGGTCG ACAAGCTTGC GGCCGCATAA TGCTTAAGTC GAACAGAAAG
181      TAATCGTATT GTACACGGCC GCATAATCGA AATTAATACG ACTCACTATA GGGGAATTGT
241      GAGCGGATAA CAATTCCCCA TCTTAGTATA TTAGTTAAGT ATAAGAAGGA GATATACATA
301      TGGCAGATCT CAATTGGATA TCGGCCGGCC ACGCGATCGC TGACGTCGGT ACCCTCGAGT
361      CTGGTAAAGA AACCGCTGCT GCGAAATTTG AACGCCAGCA CATGGACTCG TCTACTAGCG
421      CAGCTTAATT AACCTAGGCT GCTGCCACCG CTGAGCAATA ACTAGCATAA CCCCTTGGGG
481      CCTCTAAACG GGTCTTGAGG GGTTTTTTGC TGAAAGGAGG AACTATATCC GGATTGGCGA
541      ATGGGACGCG CCCTGTAGCG GCGCATTAAG CGCGGCGGGT GTGGTGGTTA CGCGCAGCGT
601      GACCGCTACA CTTGCCAGCG CCCTAGCGCC CGCTCCTTTC GCTTTCTTCC CTTCCTTTCT
661      CGCCACGTTC GCCGGCTTTC CCCGTCAAGC TCTAAATCGG GGGCTCCCTT TAGGGTTCCG
721      ATTTAGTGCT TTACGGCACC TCGACCCCAA AAAACTTGAT TAGGGTGATG GTTCACGTAG
781      TGGGCCATCG CCCTGATAGA CGGTTTTTCG CCCTTTGACG TTGGAGTCCA CGTTCTTTAA
841      TAGTGGACTC TTGTTCCAAA CTGGAACAAC ACTCAACCCT ATCTCGGTCT ATTCTTTTGA
901      TTTATAAGGG ATTTTGCCGA TTTCGGCCTA TTGGTTAAAA AATGAGCTGA TTTAACAAAA
961      ATTTAACGCG AATTTTAACA AAATATTAAC GTTTACAATT TCTGGCGGCA CGATGGCATG
1021     AGATTATCAA AAAGGATCTT CACCTAGATC CTTTTAAATT AAAAATGAAG TTTTAAATCA
1081     ATCTAAAGTA TATATGAGTA AACTTGGTCT GACAGTTACC AATGCTTAAT CAGTGAGGCA
1141     CCTATCTCAG CGATCTGTCT ATTTCGTTCA TCCATAGTTG CCTGACTCCC CGTCGTGTAG
1201     ATAACTACGA TACGGGAGGG CTTACCATCT GGCCCCAGTG CTGCAATGAT ACCGCGAGAC
1261     CCACGCTCAC CGGCTCCAGA TTTATCAGCA ATAAACCAGC CAGCCGGAAG GGCCGAGCGC
1321     AGAAGTGGTC CTGCAACTTT ATCCGCCTCC ATCCAGTCTA TTAATTGTTG CCGGGAAGCT
1381     AGAGTAAGTA GTTCGCCAGT TAATAGTTTG CGCAACGTTG TTGCCATTGC TACAGGCATC
1441     GTGGTGTCAC GCTCGTCGTT TGGTATGGCT TCATTCAGCT CCGGTTCCCA ACGATCAAGG
1501     CGAGTTACAT GATCCCCCAT GTTGTGCAAA AAAGCGGTTA GCTCCTTCGG TCCTCCGATC
1561     GTTGTCAGAA GTAAGTTGGC CGCAGTGTTA TCACTCATGG TTATGGCAGC ACTGCATAAT
1621     TCTCTTACTG TCATGCCATC CGTAAGATGC TTTTCTGTGA CTGGTGAGTA CTCAACCAAG
1681     TCATTCTGAG AATAGTGTAT GCGGCGACCG AGTTGCTCTT GCCCGGCGTC AATACGGGAT
1741     AATACCGCGC CACATAGCAG AACTTTAAAA GTGCTCATCA TTGGAAAACG TTCTTCGGGG
1801     CGAAAACTCT CAAGGATCTT ACCGCTGTTG AGATCCAGTT CGATGTAACC CACTCGTGCA
1861     CCCAACTGAT CTTCAGCATC TTTTACTTTC ACCAGCGTTT CTGGGTGAGC AAAAACAGGA
1921     AGGCAAAATG CCGCAAAAAA GGGAATAAGG GCGACACGGA AATGTTGAAT ACTCATACTC
1981     TTCCTTTTTC AATCATGATT GAAGCATTTA TCAGGGTTAT TGTCTCATGA GCGGATACAT
2041     ATTTGAATGT ATTTAGAAAA ATAAACAAAT AGGTCATGAC CAAAATCCCT TAACGTGAGT
2101     TTTCGTTCCA CTGAGCGTCA GACCCCGTAG AAAAGATCAA AGGATCTTCT TGAGATCCTT
2161     TTTTTCTGCG CGTAATCTGC TGCTTGCAAA CAAAAAAACC ACCGCTACCA GCGGTGGTTT
2221     GTTTGCCGGA TCAAGAGCTA CCAACTCTTT TTCCGAAGGT AACTGGCTTC AGCAGAGCGC
2281     AGATACCAAA TACTGTCCTT CTAGTGTAGC CGTAGTTAGG CCACCACTTC AAGAACTCTG
2341     TAGCACCGCC TACATACCTC GCTCTGCTAA TCCTGTTACC AGTGGCTGCT GCCAGTGGCG
2401     ATAAGTCGTG TCTTACCGGG TTGGACTCAA GACGATAGTT ACCGGATAAG GCGCAGCGGT
2461     CGGGCTGAAC GGGGGGTTCG TGCACACAGC CCAGCTTGGA GCGAACGACC TACACCGAAC
2521     TGAGATACCT ACAGCGTGAG CTATGAGAAA GCGCCACGCT TCCCGAAGGG AGAAAGGCGG
2581     ACAGGTATCC GGTAAGCGGC AGGGTCGGAA CAGGAGAGCG CACGAGGGAG CTTCCAGGGG
2641     GAAACGCCTG GTATCTTTAT AGTCCTGTCG GGTTTCGCCA CCTCTGACTT GAGCGTCGAT
2701     TTTTGTGATG CTCGTCAGGG GGGCGGAGCC TATGGAAAAA CGCCAGCAAC GCGGCCTTTT
2761     TACGGTTCCT GGCCTTTTGC TGGCCTTTTG CTCACATGTT CTTTCCTGCG TTATCCCCTG
2821     ATTCTGTGGA TAACCGTATT ACCGCCTTTG AGTGAGCTGA TACCGCTCGC CGCAGCCGAA
2881     CGACCGAGCG CAGCGAGTCA GTGAGCGAGG AAGCGGAAGA GCGCCTGATG CGGTATTTTC
2941     TCCTTACGCA TCTGTGCGGT ATTTCACACC GCATATATGG TGCACTCTCA GTACAATCTG
3001     CTCTGATGCC GCATAGTTAA GCCAGTATAC ACTCCGCTAT CGCTACGTGA CTGGGTCATG
3061     GCTGCGCCCC GACACCCGCC AACACCCGCT GACGCGCCCT GACGGGCTTG TCTGCTCCCG
3121     GCATCCGCTT ACAGACAAGC TGTGACCGTC TCCGGGAGCT GCATGTGTCA GAGGTTTTCA
3181     CCGTCATCAC CGAAACGCGC GAGGCAGCTG CGGTAAAGCT CATCAGCGTG GTCGTGAAGC
3241     GATTCACAGA TGTCTGCCTG TTCATCCGCG TCCAGCTCGT TGAGTTTCTC CAGAAGCGTT
3301     AATGTCTGGC TTCTGATAAA GCGGGCCATG TTAAGGGCGG TTTTTTCCTG TTTGGTCACT
3361     GATGCCTCCG TGTAAGGGGG ATTTCTGTTC ATGGGGGTAA TGATACCGAT GAAACGAGAG
3421     AGGATGCTCA CGATACGGGT TACTGATGAT GAACATGCCC GGTTACTGGA ACGTTGTGAG
3481     GGTAAACAAC TGGCGGTATG GATGCGGCGG GACCAGAGAA AAATCACTCA GGGTCAATGC
3541     CAGCGCTTCG TTAATACAGA TGTAGGTGTT CCACAGGGTA GCCAGCAGCA TCCTGCGATG
3601     CAGATCCGGA ACATAATGGT GCAGGGCGCT GACTTCCGCG TTTCCAGACT TTACGAAACA
3661     CGGAAACCGA AGACCATTCA TGTTGTTGCT CAGGTCGCAG ACGTTTTGCA GCAGCAGTCG
3721     CTTCACGTTC GCTCGCGTAT CGGTGATTCA TTCTGCTAAC CAGTAAGGCA ACCCCGCCAG
3781     CCTAGCCGGG TCCTCAACGA CAGGAGCACG ATCATGCTAG TCATGCCCCG CGCCCACCGG
3841     AAGGAGCTGA CTGGGTTGAA GGCTCTCAAG GGCATCGGTC GAGATCCCGG TGCCTAATGA
3901     GTGAGCTAAC TTACATTAAT TGCGTTGCGC TCACTGCCCG CTTTCCAGTC GGGAAACCTG
3961     TCGTGCCAGC TGCATTAATG AATCGGCCAA CGCGCGGGGA GAGGCGGTTT GCGTATTGGG
4021     CGCCAGGGTG GTTTTTCTTT TCACCAGTGA GACGGGCAAC AGCTGATTGC CCTTCACCGC
4081     CTGGCCCTGA GAGAGTTGCA GCAAGCGGTC CACGCTGGTT TGCCCCAGCA GGCGAAAATC
4141     CTGTTTGATG GTGGTTAACG GCGGGATATA ACATGAGCTG TCTTCGGTAT CGTCGTATCC
4201     CACTACCGAG ATGTCCGCAC CAACGCGCAG CCCGGACTCG GTAATGGCGC GCATTGCGCC
4261     CAGCGCCATC TGATCGTTGG CAACCAGCAT CGCAGTGGGA ACGATGCCCT CATTCAGCAT
4321     TTGCATGGTT TGTTGAAAAC CGGACATGGC ACTCCAGTCG CCTTCCCGTT CCGCTATCGG
4381     CTGAATTTGA TTGCGAGTGA GATATTTATG CCAGCCAGCC AGACGCAGAC GCGCCGAGAC
4441     AGAACTTAAT GGGCCCGCTA ACAGCGCGAT TTGCTGGTGA CCCAATGCGA CCAGATGCTC
4501     CACGCCCAGT CGCGTACCGT CTTCATGGGA GAAAATAATA CTGTTGATGG GTGTCTGGTC
4561     AGAGACATCA AGAAATAACG CCGGAACATT AGTGCAGGCA GCTTCCACAG CAATGGCATC
4621     CTGGTCATCC AGCGGATAGT TAATGATCAG CCCACTGACG CGTTGCGCGA GAAGATTGTG
4681     CACCGCCGCT TTACAGGCTT CGACGCCGCT TCGTTCTACC ATCGACACCA CCACGCTGGC
4741     ACCCAGTTGA TCGGCGCGAG ATTTAATCGC CGCGACAATT TGCGACGGCG CGTGCAGGGC
4801     CAGACTGGAG GTGGCAACGC CAATCAGCAA CGACTGTTTG CCCGCCAGTT GTTGTGCCAC
4861     GCGGTTGGGA ATGTAATTCA GCTCCGCCAT CGCCGCTTCC ACTTTTTCCC GCGTTTTCGC
4921     AGAAACGTGG CTGGCCTGGT TCACCACGCG GGAAACGGTC TGATAAGAGA CACCGGCATA
4981     CTCTGCGACA TCGTATAACG TTACTGGTTT CACATTCACC ACCCTGAATT GACTCTCTTC
5041     CGGGCGCTAT CATGCCATAC CGCGAAAGGT TTTGCGCCAT TCGATGGTGT CCGGGATCTC
5101     GACGCTCTCC CTTATGCGAC TCCTGCATTA GGAAGCAGCC CAGTAGTAGG TTGAGGCCGT
5161     TGAGCACCGC CGCCGCAAGG AATGGTGCAT GCAAGGAGAT GGCGCCCAAC AGTCCCCCGG
5221     CCACGGGGCC TGCCACCATA CCCACGCCGA AACAAGCGCT CATGAGCCCG AAGTGGCGAG
5281     CCCGATCTTC CCCATCGGTG ATGTCGGCGA TATAGGCGCC AGCAACCGCA CCTGTGGCGC
5341     CGGTGATGCC GGCCACGATG CGTCCGGCGT AGAGGATCGA GATCGATCTC GATCCCGCGA
5401     AATTAATACG ACTCACTATA




 
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