碱裂解法质粒提取试剂配方 | ||||||||
发布时间:2018-06-13 10:18:34 | 浏览次数: | ||||||||
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S1 Tris•HCl 50mM Na2EDTA·2H2O 10mM RNAse A 100ug/mL(用时再加)(国药或者浩然生物) PH8.0 8.0 用800ml H2O溶解6.06gTris,3.72g Na2EDTA·2H2O,调节PH到8.0,加水定容到1L。加酶后保存于4度。 S2 NaOH 200mM SDS 1% 用900ml H2O溶解8.0gNaOH,,加入100ml 10% SDS. S3 盐酸胍 4.09M 乙酸钾 0.759M 用700ml H2O溶解74.49g乙酸钾,390.72g盐酸胍,冰醋酸调节PH至4.2。加水至1L。过滤除菌
漂洗液W2 乙酸钾 50mM Na2EDTA·2H2O 83.5uM PH 5.0 乙醇 80%(用时再加)
基础液:用800ml ddH2O溶解4.907g乙酸钾,加入167ul 0.5M Na2EDTA·2H2O(PH8.0)溶液,用冰醋酸调节到PH5.0,加水至1L。过滤除菌。 取200ml基础液,加入800ml乙醇。
洗脱缓冲液TE 1 M Tris-HCl (pH 8.0) 50 ml的配制:称取Tris碱6.06 g,加超纯水40 ml溶解,滴加浓HCl约2.1 ml调pH至8.0,定容至50 ml。 0.5 M EDTA(pH 8.0)50 ml的配制:称取EDTA-Na2·2H2O 9.306 g,加超纯水35 ml,剧烈搅拌,用约1 g NaOH颗粒调pH至8.0,定容至50 ml。(EDTA二钠盐需加入NaOH将pH调至接近8.0时,才会溶解。)
以上为试剂盒溶液配方, 还需要吸附DNA的柱子, 最好能有一个过滤柱, 解决过滤加入S3后离心不能完全沉淀的情况。 |
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